医用矿物油类物质及油纱条的灭菌因受其本身特性的影响,仍是医院消毒灭菌的一个难题。常用的干热灭菌和压力蒸汽灭菌都存在一些弊端,而且灭菌效果不理想。90年代,微波对矿物油类物质照射灭菌已有实验室研究报道n3.为探讨其简便易行的灭菌方法和可靠的灭菌指标,采用微波照射法对石蜡油、凡士林油膏和凡士林油纱条进行了灭菌试验。现将结果报告如下。
采用枯草杆菌黑色变种(ATCC 9372)芽孢和嗜热脂肪杆菌(ATCC7953)芽孢作为灭菌生物指示菌。用滤纸片制备的菌片由军事医学科学院微生物流行病研究所提供,其染菌量为106cfu/片。
50ml、75ml分装于3个直径10cm的玻璃平皿,将枯草杆菌黑色变种芽孢和嗜热脂肪杆菌芽孢菌片各1片浸人各平皿的石蜡油内,加盖。
50g、75g分装于直径10cm的玻璃平皿内,在凡士林油膏中心分别放入枯草杆菌黑色变种芽孢和嗜热脂肪杆菌芽孢菌片各1片,加盖。
1.cm的小块,分为10层、20层、30层3组,按每小块纱布用凡士林油膏2ig,将凡士林油膏涂抹于纱布上,然后装人直径lcm的玻璃平皿内加热,使凡士林油膏均匀融于纱布中即可。分别于油纱条的上、中、下层放入枯草杆菌黑色变种芽孢菌片(上、下层菌片分别放于第2层下和倒数第二层上),加盖。
所用微波灭菌器为军事医学科学院研制,孝感微波炉厂生产,工作频率2450MHz,输出功率为650W.将液体石蜡油平皿和凡士林油膏平皿置于微波灭菌器内托盘上,距中心1.5cm,分别照射10、20、25、30、35min;将凡士林油纱条平皿外用浸湿的包布(以不滴水为宜)包裹,使上层重叠为16层湿布,下层及周围为8层,放入装有水负载的微波专用塑料盒内,盖好后放人微波灭菌器内托盘上,距中心lcm,分别照射30、40、45、50min.3种试验均在照射后立即测试液体石蜡、凡士林油膏和凡士林油纱条中心的温度并记录。
每种样品均在微波照射后以无菌操作方法取出枯草杆菌黑色变种芽孢菌片和嗜热脂肪杆菌芽孢菌片,分别种于营养肉汤管和溴钾酚紫蛋白胨培养管中,同时接种阳性对照菌片,于37°C和56t:培养72h,观察灭菌效果。以阳性对照生长良好,试验组无菌生长为灭菌合格,有菌生长为灭菌不合格。所有试验重复3次。
2.1微波照射对石蜡油的灭菌效果脂肪杆菌芽孢全部无菌生长;照射25min,可将枯草杆菌黑色变种芽孢全部杀灭;对25ml、50ml、75ml三组体积液体石蜡油灭菌效果一致表1微波照射对不同体积石蜡油的灭菌效果照射时间枯草杆菌黑色变种芽孢嗜热脂肪杆菌芽孢注:分母为试验次数,分子为试验阳性次数。在75ml石蜡油中2.2微波照射对凡士林油膏的灭菌效果微波对不同重量凡士林油膏照射25min,可将其中嗜热脂肪杆菌芽孢全部杀灭;照射30min,可完全杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢(表表2微波照射对不同重量凡士林油裔的灭菌效果照射时间枯草杆菌黑色变种芽孢嗜热脂肪杆菌芽孢注:分母为试验次数,分子为试验阳性次数。在75g凡士林中照2.3微波照射对凡士林油条的灭菌效果微波照射对凡士林油纱条的上层灭菌效果较好,依次对30层、20层、10层、油纱条分别照射40、45和50min,上层均可达到灭菌效果;中下层即使照射50min,亦只有个别菌片无菌生长(表3)。
表3微波照射对凡士林油纱条的灭菌效果照射时间(min)上中下上中下上中下(g)注:分母为试验次数,分子为试验阳性次数。试验菌为枯草杆菌黑色变种芽孢。照射40~50min,油纱条中温度为71‘C~试验结果表明,医用微波灭菌器在输出功率650W条件下,对一定量的石蜡油和凡士林照射25~30min可达到良好的灭菌效果,但对凡士林油纱条灭菌效果不理想。
试验发现,对石蜡油、凡士林油膏和凡士林油纱条灭菌效果不同,原因可能是粘度大小不同对能量吸收速度不同所致,这从所测温度可反映出来,石蜡油较稀,照射相同时间,比凡士林油膏温度高得多,相差53°C~64°C,凡士林油纱条测出的温度*低。
试验还证明,在矿物油类物质中,枯草杆菌黑色变种芽孢对微波的抗力大于嗜热脂肪杆菌芽孢,此与其他研究报道一致D,故以前者作为微波灭菌的生物指示菌更合理更安全。
微波常规照射对凡士林油纱条的灭菌效果不理想。照射时间虽长达50mm,仍不能达到全部杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢的作用:虽然微波在试验菌范围内对石蜡汕和凡士林油膏有比较好的灭菌效果,但若用于临床实际,尚需作进一步研究。


